Detection of herpes simplex-1 and -2 and varicella zoster virus by quantitative real-time polymerase chain reaction in corneas from patients with bacterial keratitis / Detecção de vírus herpes simplex tipo 1 e 2 e varicella zoster por reação em cadeia de polimerase em tempo real em córneas de pacientes com ceratites bacterianas

ABSTRACT Objective: Bacterial keratitis occurs worldwide, and despite recent developments, it remains a potentially blinding condition. This study assesses the presence of herpes simplex virus (HSV-1 and -2) and varicella zoster virus (VZV) by quantitative real-time polymerase chain reaction (qPCR) in corneal scrapings from patients with bacterial keratitis. Methods: A total of 65 patients with clinical diagnoses of infectious corneal ulcers prospectively underwent clinical eye examinations. Corneal scrapings were investigated by Gram staining, Giemsa staining, culture, and qPCR (the study group). Risk factors and epidemiological data were recorded. The control group comprising 25 eyes with typical herpes dendritic keratitis was also analyzed by qPCR. Results: From the study group (n=65), nine patients (13.8%) had negative smears, cultures, and qPCR findings. Fifty-six (86.2%) patients had positive cultures: 51 for bacteria, 4 for fungi, and 1 for amoebae. Of the patients who had positive bacterial cultures, qPCR identified 10 patients who were also positive for virus: one for VZV and nine for HSV-1. Of the 25 patients in the control group, 21 tested positive for HSV-1 by qPCR analysis. Conclusions: Herpes may be present in patients with bacterial corneal ulcers, and qPCR may be useful in its detection.

RESUMO Objetivo: Ceratites bacterianas ocorrem mundialmente e apesar dos novos desenvolvimentos permanece como uma condição que pode levar à cegueira. Avaliar a presença de herpes simples (-1 e -2) e vírus varicella zoster (VZV) por reação em cadeia quantitativa de polimerase em tempo real (qPCR) em raspados corneanos de pacientes com ceratite bacteriana. Métodos: Sessenta e cinco pacientes com ceratite infecciosa foram submetidos a raspados corneanos estudados para gram, Giemsa, cultura e qPCR (grupo de estudo). Foram avaliados fatores de risco e epidemiológicos. O grupo controle foi composto por 25 casos de úlcera dendrítica típica por herpes analisados por qPCR. Resultados: Do grupo de estudo (n=65), nove pacientes (13,8%) apresentaram cultura, qPCR e raspado negativos. Cinquenta e seis (86,2%) pacientes apresentaram cultura positiva, 51 para bacteria, 4 para fungo e 1 para ameba. A qPCR identificou 10 pacientes do grupo de cultura positiva para bactéria que também foram positivos para vírus, um VZV e 9 para HSV-1. Dos 25 pacientes que compunham o grupo controle, 21 apresentaram qPCR positivo para HSV-1. Conclusão: Herpes pode estar presente em pacientes com úlceras de córnea bacterianas e a qPCR pode ser útil na sua detecção.

Serological profile of candidates for corneal donation / Perfil sorológico de candidatos a doação de córneas

Objetive: The purpose of this study is to map the serological profile of candidates to corneal donation at Irmandade Santa Casa de Misericórdia de Porto Alegre, identifying the percentage of disposal by serology and the marker involved. Methods: There have been analised – retrospectively – the results of serology of all corneal donors, made between the period of 1st january 2006 and 31st december 2012. Data analised were related to age, gender and the results of serology pertinent to viral markers (HBsAg, anti-HBc, anti-HCV and anti-HIV), these, determined by immunosorbent tests (ELISA). Results: In the period of the study, there were 2476 corneal donors at the institution, with a major incidence on the male gender, on an average of 58.7 years old. 23% of retention because of serological unfitness was also identified, that is, 570 samples were non-negative to any of the used tests. The marker anti- HBc was the most prevalent on the studied population, followed by the Hepatitis C virus (HCV) and by the Human Immunodeficiency Virus (HIV). Conclusion: From the data found through this study, it is essential to have the participation of an efficient service on the serological evaluation of the candidates to corneal donation, once the security of the receptor must be taken into consideration in a population of donors with 23% of unfitness prevalence, in which the most prevalent marker is the one of Hepatits B. .

Objetivo: O intento deste desígnio é mapear o perfil sorológico dos candidatos a doação de córneas na Irmandade Santa Casa de Misericórdia de Porto Alegre, identificando o percentual de descarte por sorologia e o marcador envolvido. Métodos: Foram analisados – retrospectivamente – os resultados da sorologia de todos os doadores de córneas compreendidos entre 01 de janeiro de 2006 a 31 de dezembro de 2012. Foram avaliados os dados de idade, sexo e os resultados da sorologia pertinentes aos marcadores virais (HBsAg, anti-HBc, anti-HCV e anti-HIV) determinados por testes imunoenzimáticos (ELISA). Resultados: No período coberto pelo estudo, houve 2476 doadores de córneas na instituição, com maior ocorrência do sexo masculino e média de 58,7 anos de idade. Foram verificados 23,0% de retenção por inaptidão sorológica, ou seja, 570 amostras mostraram-se não-negativas para qualquer dos testes empregados. O marcador anti-HBc foi o mais prevalente na população aferida, seguido pelo vírus da hepatite C (HCV) e pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV). Conclusão: Diante dos dados encontrados por este estudo, torna-se decisiva a participação de um serviço eficaz no tangente à avaliação sorológica dos candidatos à doação de córnea, uma vez que a segurança do receptor deve ser considerada numa população de doadores com prevalência de retenção por inaptidão sorológica de 23,0%, donde o marcador mais prevalente é o de hepatite B. .

Descarte de córneas por sorologia positiva do doador no Banco de Olhos do Hospital São Paulo: dois anos de estudo / Discarded corneas due to positive donor's serologic test in the Hospital São Paulo Eye Bank: a two-year study

Objetivos: Investigar descarte de córneas por sorologia positiva de doadores no Banco de Olhos do Hospital São Paulo (BOHSP) durante período de dois anos. Métodos: Revisão retrospectiva de prontuários de doadores de córneas do BOHSP entre janeiro de 2006 a dezembro de 2007.Correlações de dados como sorologias dos doadores (Hepatites B, C e HIV), procedência, sexo e faixa etária dos mesmos foram testados. Resultados:Das 902 córneas processadas no BOHSP, 12,9% (116) apresentaramresultado positivo para hepatite B, hepatite C ou HIV em seus doadores;20,5% (185) apresentaram testes sorológicos inconclusivos perfazendouma porcentagem de 33,4% (301) de córneas descartadas no período estudado devido a resultado positivo ou inconclusivo da sorologia dos doadores. Conclusão: O estudo confirma a validade e a importância da realização de testes sorológicos para prevenção de doenças que poderiam ser transmitidas aos eventuais receptores de córneas. Entretanto, testes mais eficazes são necessários para diminuir o número de casos de sorologias inconclusivas, visando diminuir o descarte de córneas que poderiam ser utilizadas.

Purpose: To investigate discarded corneas due to positive serologic tests in donors from the Hospital São Paulo EyeBank (BOHSP) during a two-year period. Methods: Retrospective study of records from cornea donors between January 2006 and December 2007. Information such as serologic test results (Hepatitis B, C, and HIV), source of corneal tissue, donor’s gender and age were tested for correlation. Results:902 corneas were processed by BOHSP; 12.9% (116) were discarded due to donor’s positive test for hepatitis B, C, orHIV; 20.5% (185) were also discarded due to inconclusive result of serological tests; percentage of corneas discardeddue to positive or inconclusive serological tests during this period was 33.4% (301). Conclusion: This study confirms the importance of serological tests in order to prevent disease transmission to corneal transplant recipients. However, new tests are necessary to decrease the number of inconclusive tests and decrease the number of discarded corneas.

Laboratory results in ocular viral diseases: implications in clinical-laboratory correlation

PURPOSE: To document etiology and predictive value of clinical diagnosis in laboratory confirmed viral diseases. METHODS: Reports of culture-positive cases of samples collected from patients presenting from January 1987 - December 2001 were evaluated. RESULTS: One thousand nine hundred and sixty-four (1964) cultures were submitted during 1987-2001. Twenty-six percent were positive (514). Human herpesvirus 1 was the most frequent agent isolated from all positive culture (56 percent). Adenovirus was the most common virus isolated from conjunctiva (66 percent), human herpesvirus 1 from lid and cornea (76 percent, 88 percent) and cytomegalovirus from vitreous (27 percent). Some unusual pathogens were recovered from conjunctiva as cytomegalovirus and from cornea as adenovirus, enterovirus and cytomegalovirus. Recognition of common viral syndromes was human herpesvirus 1 (88 percent), epidemic keratoconjunctivitis (88 percent), acute hemorrhagic conjunctivitis (70 percent) and varicella zoster virus (100 percent). However, some misdiagnosed cases were observed. Thirteen percent of conjunctivitis thought to be caused by herpes were due to adenovirus, 3.2 percent to Enterovirus, 3.2 percent to varicella zoster virus and 3.2 percent to human cytomegalovirus. Also, 5 percent of cases with a clinical diagnosis of herpes keratitis were caused by adenovirus and 2.7 percent by enterovirus. Finally, 4.8 percent of cases thought to be adenovirus conjunctivitis were herpes conjunctivitis. CONCLUSIONS: Human herpesvirus 1 remains the most frequently isolated virus from ocular sites in general (56 percent). Nonherpetic corneal isolates were in decreasing order: adenovirus, enterovirus and cytomegalovirus. Clinical and laboratory correlation was less than 90 percent. The most misdiagnosed cases were herpes conjunctivitis and keratitis, some cases of adenovirus conjunctivitis some cases of acute hemorrhagic conjunctivitis. It is essential that a rapid and...

OBJETIVOS: Documentar a etiologia e prever a importância do diagnóstico clínico em doenças virais oculares confirmadas em laboratório. MÉTODOS: Todos os relatórios de pacientes com cultura viral positiva durante o período de janeiro 1987 - dezembro 2001 foram analisados. RESULTADOS: Quinhentos e quatorze (514) casos foram encontrados. Em geral, herpesvírus 1 humano foi o agente mais freqüentemente isolado. Adenovírus foi o vírus mais comumente isolado da conjuntiva (66 por cento), herpesvírus 1 humano das pálpebras e córnea (76 por cento, 88 por cento respectivamente) e citomegalovírus do vítreo (27 por cento). Alguns agentes não usuais foram isolados da conjuntiva como citomegalovírus e da córnea como adenovírus, enterovírus e citomegalovírus. Reconhecimento das síndromes virais comuns foi: herpervírus 1 humano (88 por cento), ceratoconjuntivite epidêmica (88 por cento), conjuntivite aguda hemorrágica (70 por cento). Porém, alguns casos com diagnóstico incorreto foram observados. Treze por cento das conjuntivites com diagnóstico de herpes foram causadas por adenovírus, 3,2 por cento por enterovírus, 3,2 por cento por varicella zoster vírus e 3,2 por cento por citomegalovírus. Também, 5 por cento dos casos com diagnóstico clínico de ceratite herpética eram adenovírus e 2,7 por cento enterovírus. Além disso, 4,8 por cento dos casos em que se pensaram em conjuntivite por adenovírus, eram conjuntivite por herpes. Finalmente, 30 por cento dos casos em que se diagnosticaram conjuntive hemorrágica aguda, o agente etiológico era adenovírus. CONCLUSÃO: Em geral herpesvírus humano 1 continua a ser o vírus mais comum encontrado nas infecções oculares (56 por cento). Agentes não herpéticos isolados da córnea foram em ordem decrescente: adenovírus, enterovírus e citomegalovírus. A correlação entre o diagnóstico clínico e laboratorial foi menor do que 90 por cento. Um diagnóstico rápido e específico é essencial em casos de apresentações virais atípicas...

Human herpesvirus type 6 in human corneas

Fifty six corneas from normal individuals and twenty-five corneas from patients with confirmed herpes simplex virus type 1 [HSV-1] keratitis were analyzed using the polymerase chain reaction test for the absence or presence of human herpesvirus type 6 [HHV-6] DNA sequences. Fifty% of the corneas from the normal donors and 25% of the corneas from the HSV-1 keratitis patients were found positive for HHV-6 DNA sequences. The significance of the presence of HHV-6 in the corneas of the keratitis patients is discussed